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来源: 摩贝原创 2021-10-20
多聚甲醛固定液被用于细胞组织切片等生物组织的固定。因其对于生物细胞损害小、温和、便捷、使用性能广,所以在生物解刨和化学试验中经常会见到它的身影。不过很多人也会有疑问:多聚甲醛固定液是怎么配制的?为什么要按照4%的比例来配制?
一、多聚甲醛固定液是怎么配置的?
方法一
因为多聚甲醛很难溶解,只有在碱性条件下加热才可以溶解完全。
首先把多聚甲醛加入蒸馏水溶解为8%的比例
加入500毫升的0.2的抗氧化剂MPB
用水加热溶解其苦酸味,快点的方法是用电炉加热烧瓶,溶液放在烧瓶中。
继续加热。80克的多聚甲醛粉剂加入400毫升的双蒸水,在沸水中煮半小时。
加入氢氧化钠搅拌至清澈。
方法二
两克多聚甲醛放在五十毫升的 pbs缓冲液中。密闭在一个箱子里,用37度温度静至两天即可。
其实这两种方法不同在于,蒸馏水适用于细胞组织很小的时候,稍微浸泡下就能达到效果。而后者多聚甲醛固定液配制方法适合于组织块很大,对固定要求很高并且可能时间很长的时候。
二、为什么多聚甲醛固定液要配置到4%?
1.此时穿透力强,固定起来样品均匀。
2.能使细胞硬化,有利于切片试验。
3.对细胞组织损耗小,具体表现为收缩比例小。能很好的保存样品,在试验时候观察细胞组织的结构和抗原性都很好。
4.还可以用于固定保存脂肪或者脂类物质。
5.利于维持细胞组织本身的ph值,抑制甲醛多聚物的产生。
以上关于多聚甲醛固定液配置方法和比例就讲到这里了,希望对大家有所帮助。
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